经过充分的理论总结，终于得出了根皮素的分离纯化方法

欣贝莱生物

简单的说，分离纯化是将混合物中所需的单一物质分离出来的一种提纯操作。而我们这次探索的则是目前还未明确被人提出过的——根皮素发酵过程中的分离提纯方法。

根皮素，别名三羟苯酚丙酮2,4,6-三羟基-3-(4-羟基苯基)苯丙酮。是国外新近研究开发出来的一种新型天然皮肤美白剂，主要分布于苹果、梨等多汁水果的果皮及根皮。根皮素可应用于面膜、护肤膏霜、乳液和精华素中。根皮素能抑制皮脂腺的过度分泌，用于治疗分泌旺盛型粉刺;能抑制黑色素细胞活性，对各种皮肤色斑有作用。与同类天然成分熊果苷和曲酸相比，同等浓度的根皮素对酪氨酸酶的抑制作用要好于它们，并且当其与熊果苷和/或曲酸进行复配时，能大大提高产品对酪氨酸酶的抑制率，使抑制率达到100%。

但是植物果皮提取法存在很多弊端，如：产量过低、能耗过大等，一吨果皮及根皮只能提取到“g”级的根皮素。因此，嘉兴欣贝莱生物科技有限公司致力于根皮素绿色合成方法的研究——采用酵母菌发酵合成根皮素，10L的小发酵罐也同样能达到“g”级产量。

该方法具有低能耗、高产量等特点，但是其分离纯化仍是一个需要去攻克的难题，因此，嘉兴欣贝莱生物科技有限公司经过大量文献参考以及实验实践，终于得出了一个完整的根皮素分离纯化体系。

我们以白藜芦醇粗产品的分离纯化为例，采用柱层析法分离提纯白藜芦醇，以大孔树脂为填充物，乙醇位洗脱剂，对其进行分离纯化操作。而大孔树脂的预处理对于整个提纯工艺也是至关重要。可以先将大孔树脂放置于其体积3~4倍的乙醇中浸泡12小时，再用网筛滤去较小的颗粒，留下颗粒较大且大小均匀的树脂，最后将其湿法装入层析柱，并且继续用醇冲洗至流出液与水一定比例混合不呈现乳白色，然后用大量蒸馏水洗去柱内的醇即可，但是如有需要，也可以进一步采用酸碱处理来进一步的消除树脂中的杂质。

分离纯化时，一般采用动态法，因为其具有操作方便，对目标物质吸附量大，还有很好的分离作用等特点。采用不同浓度的洗脱剂对其进行洗脱，再对洗脱液进行液相检测，即可得到不同浓度洗脱剂的洗脱效果趋势图，可以很直观的表现出不同浓度洗脱剂所能达到的洗脱效果，为以后再一次分离纯化实验洗脱剂的选择打下良好基础。取产物浓度较高的洗脱液 进行减压浓缩即可得到纯度较高的产物，如需进一步精制提纯，则可以使用重结晶法来提高产品的纯度。以白藜芦醇粗产品的分离纯化为例，洗脱率随浓度变化如下图。

嘉兴欣贝莱生物科技有限公司所研究的以生物合成法合成的根皮素粗产品的分离提纯与上诉提纯方法相类似，该方法用预处理过后的大孔树脂装柱，再将浓缩过后的根皮素粗产物装入层析柱，以不同浓度的甲醇为洗脱剂对根皮素粗产品进行洗脱（之后步骤和目的与上述分离纯化相同，因此不作过多说明），最终可以达到85%~90%的洗脱率，如需进一步精制提纯，则可以使用重结晶法来提高产品的纯度。

嘉兴欣贝莱生物公司建立了自己的高标准研发实验室，配套了先进的研发设备和仪器；同时我们拥有一支高学历、有丰富研发经验的专业技术人才团队，励志于打造绿色制造时代，引领国内合成生物领域的潮流。公司的技术团队可以提供可靠的基因组大数据分析、转录组分析服务,挖掘相关关键信息；酶设计、合成、改造服务；特定高附加值化学品合成生物学工艺研发开发服务。