细胞综合试题

hu123

细胞综合试题

一、判断题（每小题1分，共10分）

1、细胞周期的时相发生顺序为G1-S-G2-M-G1（   √）

2、灭菌时，紫外灯和日光灯可以同时开启 （  ×    ）

3、实验室内常用消毒酒精的浓度是90%乙醇（  ×   ）

4、水泡性口炎病毒可在土壤中于4～6℃存活若干天。对石炭酸能抵抗23天，0.05%结晶紫可使其失去感染性，不耐酸。（  √ ）

5、细胞计数时，对于出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。（   √）

6、细胞板上显示16格×25格，细胞计数板计算公式：细胞数/ml=80小格内细胞个数/80×400×10000×稀释倍数 (   ×   )

7、细胞技术中进行细胞培养时，人工模拟体内环境的技术已经很高，人工所模拟的条件与体内实际情况完全相同（  ×  ）

8、几乎所有细胞都有典型的结构特征：细胞质膜、核糖体和细胞基因组（√   ）

9、用于细胞培养的超净工作台主要有两种，分别是侧流式超净台和外流式超净台（  √  ）

10、地面消毒时使用的新洁尔灭浓度是0.1%~0.5%（   √   ）

二、填空题（每题1分，共20分）

1、洁净室的理想温度范围（     15℃~25     ）湿度范围（     30%~50%      ）

2、用于防止微生物进入人体组织或其他无菌范围的操作技术称为（ 无菌操作      ）

3、影响细胞生长的因素：（    温度     ）、（气体环境  ）、（   PH  ） （     湿度    ）和（      光    ）等

4、细胞周期可以分为（    间期    ）和（  分裂期   ）

5、病毒的繁殖过程分为（      吸附      ）、（  侵入）、（  复制  ）、（装配   ）、（    释放  ）。

6、细胞培养中常加“双抗”，它指的是（     青霉素  ）和（  链霉素      ）两种抗生素

7、动物细胞培养中，实验室常用培养器皿主要有（   培养瓶  ）、（培养板）和（   培养皿   ）

三、简单题（每题10分，共30分）

1、倒置显微镜使用注意事项?

开机前确认光强调节处于最小开启电源开关。

在连续使用倒置显微镜期间，不得频繁开关机，以免烧坏光源灯泡

使用结束后，尤其是准备离开实验室前，务必及时关闭电源开关

检查载物台有无粉尘或废弃液，如有必要，如有必要，使用酒精棉球擦拭载物台表面粉尘。待酒精和水分挥发干燥后，调节旋钮使光强处于最小状态。罩上防尘罩。

四、论述题（每题20分，共40分）

1、细胞培养中主要污染途径有哪些？怎样辨别和预防污染？

胞培养污染可分为以下三类：物理性、化学性及生物性

培养环境中的物理因素，如温度、放射线、振动、辐射会对细胞产生影响，细胞、培养液或其它培养试剂暴露于放射线、辐射或过冷过热的温度中，可以引起细胞代谢发生改变，如细胞同步化、细胞生长受抑制甚至细胞死亡。通过实验室的合理设计及建立规范的操作规程，可以减少环境中物理因素对细胞的影响。孵箱应放在温度较恒定的环境中，四周不能放置能引起机械振动的设备，如离心机。培养液及培养试剂应放在固定的位置，为避免光照试剂不能放在玻璃门的冰箱中，试剂四周不能放同位素。培养液从冰箱中取出后应在室温中放置一段时间后再进行实验，以避免过冷的温度对细胞的影响

不同细胞对化学物质污染的反应是不一样的。未纯化的物质、试剂、水、血清、生长辅助因子及储存试剂的容器都可能成为化学性污染的来源。细胞培养的必需养分，如氨基酸，若浓度超过了合适的范围，也会对细胞产生毒性。同样，不同细胞系其最佳培养条件下对血清和缓冲液的要求是不一样的，在培养中应严格控制。玻璃制品清洗过程中残留的变性剂或肥皂是最常见的化学性污染。

生物性污染：危害及预防外界的微生物如昆虫、节肢动物、原虫、霉菌、病毒、细菌、无细胞壁的微生物和其它类型的细胞都可能侵入培养环境引起污染。

污染发生后首先应确定污染物的种类及污染的程度。为了能正确检测细菌或支原体的污染，应先撤去培养液中的抗生素。常规细胞传代培养中应用抗生素会导致:①掩盖了不很严重的污染;②导致了耐药菌的产生。每一种抗生素的抗菌谱都是有限的，而且许多抗生素仅是抑制细菌生长，而非杀菌剂。因为支原体无细胞壁，所以青霉素，头孢菌素等干扰细胞壁合成的抗生素对于支原体无效。菌检及支原体检测只有在撤去抗生素后才能进行。实验中若发生污染或其它问题应有详细的记录，并由经验丰富的专家分析，找出哪个环节出了问题，包括培养液的配置、实验室环境的保持和无菌操作过程等，从而不断完善操作规程，避免类似问题的现。因此，大型实验室应严格制定各项操作程序及规章制度。细胞培养中无菌操作需要清洁的工作环境、实验的合理安排、实验者熟练的操作技巧及强烈的责任感。只有通过不断地学习、训练，才能熟练掌握无菌操作技术。为了尽可能减少污染的发生，以常规检查的方式来监督是必要的。细胞培养中发生污染是不可避免的，我们的目的是尽可能减少污染的发生及危害。

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