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标题: 透析袋的使用方法 [打印本页]

作者: hu123 时间: 2014-11-13 17:28
标题: 透析袋的使用方法

透析袋预处理方法 -

（1）将透析管剪成适当长度，10-20cm的小段，即形成透析袋

（2）在大体积2％（m/V）碳酸氢钠和1mmol/LEDTA（PH*8.0）中将透析袋煮沸10min

（3）将透析袋用蒸馏水彻底漂洗

（4）将透析袋置1mmol/L EDTA（PH*8.0）中煮沸10min

（5）将透析袋冷却，存放于4摄氏度，应确保透析袋始终浸没在液体中。

重要：从此步起用透析袋时一定要带手套操作

（6）在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。

透析和透析袋的处理

保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为"保留液"，袋（膜）外的溶液称为"渗出液"或"透析液"。透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

目前常用的是美国Union Carbide （联合碳化物公司）和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管，截留分子量MwCO（即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量，缩写为MwCO）通常为1 万左右。为防干裂，出厂时都用10％的甘油处理过，并含有极微量的硫化物(0.1%)、重金属和一些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋白质和其它生物活性物质有害，用前必须除去。

可先用50％乙醇煮沸1小时，再依次用50％乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。实验证明，50％乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。（也可先在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟，用蒸馏水彻底清洗后，再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。）使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中，确保透析袋始终浸没在溶液内。若长时间不用，可加少量NaN3，以防长菌。从此时起取用透析袋必须戴手套。洗净晾干的透析袋弯折时易裂口，用时必须仔细检查，不漏时方可重复使用。

新透析袋如不作如上的特殊处理，则可用沸水煮五至十分钟，再用蒸馏水洗净，即可使用。通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加50％是正常的。为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用磁子搅拌。小量体积溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。

检查透析效果的方法是：用1％ BaCl2检查(NH4)2SO4，用1％ AgNO3 检查NaCl、KCl等

用过的透析袋保存前需要怎么处理？

用生理盐水浸泡以去掉蛋白，并用蒸馏水清洗干净，然后置50％乙醇中保存即可；用完以后,要彻底洗干净,透析袋也可以保存在0.1%叠氮钠（可防止微生物生长）里；0.05%-0.1%叠氮钠，或者1mM EDTA，或者50％甘油中4度保存，前两种保存比较好！

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